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怎樣對(duì)合成DNA/RNA制品進(jìn)行定量、如何測(cè)定并計(jì)算OD值?

由于核酸在260 nm附近有強(qiáng)吸收,因此常根據(jù)此性質(zhì),用紫外分光光度計(jì)測(cè)定核酸溶液在260 nm的吸光度值,據(jù)此對(duì)核酸進(jìn)行定量,用OD值來表示。1 OD是指:置于光路長度為1 cm的比色皿中的DNA/RNA溶液,如果其在260 nm處的吸光度值為1,則稱1 ml該溶液中溶解的DNA/RNA的量為1 OD。1個(gè)OD值的合成DNA/RNA的質(zhì)量約為33 μg。將DNA/RNA溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋,使吸光度測(cè)定值與樣品濃度的關(guān)系在直線范圍內(nèi),再根據(jù)原溶液的總體積與稀釋倍數(shù)計(jì)算該溶液的總OD值。例如,一個(gè)200 μl的DNA/RNA溶液,如果對(duì)其進(jìn)行6倍稀釋,測(cè)定值為1.0時(shí),則該溶液的總OD值為:0.2 ml×6×1.0 OD/ml=1.2 OD 。

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